Северный (Арктический) федеральный университет имени М. В. Ломоносова
Москва, Россия
Пушкино, г. Санкт-Петербург и Ленинградская область, Россия
Караваево, Костромская область, Россия
Пушкино, г. Москва и Московская область, Россия
Пушкино, г. Москва и Московская область, Россия
Введение. Спрос на продукцию лесных ягодных растений с высокой пищевой и лекарственной ценностью, которые активно используются в пищевой промышленности и медицине, возрастает. Клональное микроразмножение является наиболее эффективным методом для получения большого количества высококачественного посадочного материала. Использование светодиодов для освещения растений при клональном микроразмножении является наиболее актуальным. Цель – изучить влияние освещения различного спектрального диапазона на процесс корнеобразования лесных ягодных растений в культуре in vitro. Объекты и методы исследования. Растения-регенеранты различных сортов и перспективных форм голубики полувысокорослой, княженики арктической, клюквы крупноплодной, клюквы болотной, брусники обыкновенной и красники. На этапе «укоренение in vitro» изучалось влияние типа освещения на рост и развитие корневой системы лесных ягодных растений in vitro при использовании белых люминесцентных ламп, светодиодных ламп белого спектра и светодиодных ламп с комбинацией белого, красного и синего спектров. Результаты и их обсуждение. Наибольшее количество (3,4–14,6 шт.) и максимальная суммарная длина (10,0–156,9 см) корней растений голубики, княженики, клюквы, брусники и красники на этапе укоренения in vitro отмечены при освещении надземной части растений светодиодными лампами с комбинацией белого, красного и синего спектров. Это в 1,1–2,8 и 2,0–4,5 раза больше, чем при освещении светодиодными лампами белого спектра; в 2,3–7,0 и 3,3–14,9 раза больше, чем при освещении люминесцентными лампами. Существенных различий между биометрическими показателями, в зависимости от сорта или формы, не отмечено. Выводы. Использование светодиодных ламп положительно воздействует на процесс ризогенеза лесных ягодных растений при клональном микроразмножении в сравнении с люминесцентными лампами, а применение комбинации белого, синего и красного спектров способствует значительному увеличению биометрических показателей растений на этапе укоренения in vitro.
Клональное микроразмножение, in vitro, корнеобразование, голубика, княженика, клюква, брусника, красника, светодиодные лампы, спектр
Введение
В настоящее время во всем мире возрастает спрос на продукцию лесных ягодных растений, обладающих высокой пищевой и лекарственной ценностью, таких как клюква, голубика, брусника, черника, княженика, морошка, красника и др. Ягоды активно используются в пищевой промышленности и могут употребляться как в свежем, так и в переработанном виде (соки, компоты, морсы, сиропы, чаи, варенья, джемы, добавки к мучным, кондитерским, консервированным изделиям и т. д.). Плоды и листья большинства лесных ягодных растений содержат целый ряд витаминов (A, B1, B2, B5, B6, С, PP, K1), а также микро- и микроэлементы, сахара, антоцианы, лейкоантоцианы, катехины, пектины, дубильные вещества, органические кислоты и другие соединения.
Голубика особенно богата веществами Р-витаминного действия, участвующими в окислительно-восстановительных процессах, регулирующими работу желез внутренней секреции, обладающими противовоспалительным и противоопухолевым действием. В ягодах княженики содержится большое количество эллагитанина, препятствующего развитию вредных кишечных бактерий. Экстракты плодов клюквы оказывают антисептическое, гипотензивное и противоцинготное действие и обеспечивают проявление гемостатического эффекта, повышают уровень гемоглобина, поддерживают работу сердечно-сосудистой системы. Брусника содержит арбутин, урсоловую кислоту и широкий спектр других биологически активных веществ, повышающих ее лекарственную ценность. В плодах красники обнаружены вещества, обладающие гепатопротекторным действием.
Обладая антиоксидантным, антибактериальным действием и другими лечебными свойствами, данные ягодные растения могут широко применяться в медицине при лечении множества заболеваний (атеросклероз, авитаминоз, гипертония, ревматизм, почечнокаменная болезнь, анемия, острые респираторные и простудные заболевания, бронхиальная астма, стоматиты, различные заболевания печени, желудка, мочеполовой системы, кожные болезни и др.). Кроме того, экстракты данных растений применяют в косметологии, народной медицине, а декоративные посадки некоторых ягодных культур успешно используются в ландшафтном дизайне [1–12].
В связи с усилением антропогенного влияния естественные запасы данных видов, особенно имеющих ограниченный ареал произрастания (а в некоторых районах являющихся редкими и исчезающими), резко снижаются. Особое значение приобретает выращивание посадочного материала хозяйственно ценных лесных ягодных растений для культивирования их в промышленных масштабах. Создание плантаций востребованных видов ягодников позволит не только существенно восполнить их ресурсы, увеличить биологическое разнообразие природной среды и удовлетворить спрос потребителей, но также предотвратить разрушение экосистем при рекультивации данными посадками неиспользуемых, вышедших из промышленного оборота земель. В том числе выработанных торфяных месторождений, которые имеют наиболее подходящие условия для произрастания многих таежных и болотных видов [13].
Для получения большого количества высококачественного посадочного материала ягодных растений наиболее целесообразным является использование современных биотехнологических методов размножения с помощью культуры клеток и тканей. Например, клональное микроразмножение. Данный метод позволяет в короткие сроки и круглогодично получать значительное количество оздоровленных растений (включая виды, плохо размножаемые с помощью традиционных способов), а также является менее трудозатрадным и экономически эффективным [14].
Выращиванием перспективных сортов и форм хозяйственно ценных лесных ягодных растений (голубика узколистная (Vaccinium angustifolium Ait.), голубика полувысокорослая (Vaccinium corymbosum L. × Vaccinium angustifolium Ait.), княженика арктическая (Rubus arcticus L.), клюква крупноплодная (Oxycoccus мacrocarpus Pers.), клюква болотная (Oxycoccus palustris Pers.), брусника обыкновенная (Vaccinium vitis-idaea L.), красника (Vaccinium praestans Lamb.), жимолость съедобная (Lonicera edulis Turcz.), морошка приземистая (Rubus chamaemorus L.) и др.) в культуре in vitro с 2015 года занимаются в филиале ФБУ ВНИИЛМ «Центрально-европейская лесная опытная станция» [15–18].
Свет является важнейшим условием для жизнедеятельности растений, дающим энергию для процесса фотосинтеза. При подборе оптимальных источников освещения для растений как в научных исследованиях, так и при работе на сельскохозяйственных предприятиях более предпочтительнее становится использование белых светодиодов с излучением, содержащим компоненты всех основных полос в диапазоне фотосинтетически активной радиации (ФАР). При этом спектральный состав по-разному оказывает влияние на рост и развитие растений, а различные участки спектрального диапазона имеют разное воздействие на регуляцию морфогенетических и физиологических процессов в растениях. Кроме того, применение белых светодиодов не ограничивается только белым спектром. Их можно использовать в комбинациях с узкополосными красными и синими светодиодами [19–21]. В связи с тем, что на сегодняшний день не так много исследований, посвященных изучению влияния типа освещения на органогенез лесных ягодных растений в культуре in vitro, эксперименты в данном направлении представляют как теоретическую, так и практическую ценность.
Цель исследования – изучение влияния типа освещения на процесс ризогенеза лесных ягодных растений при клональном микроразмножении.
Объекты и методы исследования
Исследования по выращиванию лесных ягодных растений в культуре in vitro проводили в лаборатории клонального микроразмножения растений на базе филиала ФБУ ВНИИЛМ «Центрально-европейская лесная опытная станция» в 2016–2020 гг.
В качестве объектов исследования использовались растения голубики полувысокорослой (сорт «Нортблю» и гибридная форма 23-1-11), княженики арктической (сорт «Анна» и гибридная форма К-1), клюква крупноплодная (сорт «Бен Лир» и гибридная форма 1-23-3), клюквы болотной (сорт «Дар Костромы» и гибридная форма 1-15-635), брусники обыкновенной (сорта «Рубин» и «Костромская розовая»), красники (Курильская и Сахалинская формы).
Растения голубики, клюквы и красники культивировали на питательной среде WPM (Wood Plant Medium), княженики – на питательной среде MS (Мурасиге-Скуга), брусники – на питательной среде Андерсона в условиях световой комнаты при температуре от +23 до +25 °C, влажности 75–80 % и фотопериоде 16/8 ч. На этапе «собственно микроразмножение» применяли регуляторы роста цитокининовой группы: при выращивании голубики, клюквы, брусники и красники – 2-изопенталаденин (2ip) в концентрациях 1,0–5,0 мл/л; при выращивании княженики – 6-бензиламинопурил (6-БАП) в концентрации 0,5 мл/л. На этапе укоренения in vitro использовали регуляторы роста ауксиновой группы. При выращивании голубики, клюквы, брусники и красники – индолилуксусная кислота (ИУК) в концентрации 0,5–1,0 мл/л; при выращивании княженики – индолилмасляная кислота (ИМК) в концентрации 0,5 мл/л.
При изучении влияния света на рост и развитие размножаемых растений использовали лампы различного спектрального состава: 1) ЛБ – люминесцентные лампы белого цвета (λ = 600 нм); 2) СД-Б – светодиодные лампы белого спектра (λ = 653 нм); 3) СД-Б+К+С – светодиодные лампы с комбинацией белого (λ = 653 нм), красного (λ = 670 нм) и синего (λ = 455 нм) спектров (рис. 1). Пробирки с растениями-регенерантами размещали в штативах из пенопласта, закрывающих от света корневую систему, и подвергали постоянному освещению. Учитывали количество, среднюю и суммарную длину корней в расчете на одно растение. Опыты проводили в 10-кратной биологической и 2-кратной аналитической повторностях.
| Введение В настоящее время во всем мире возрастает спрос на продукцию лесных ягодных растений, обладающих высокой пищевой и лекарственной ценностью, таких как клюква, голубика, брусника, черника, княженика, морошка, красника и др. Ягоды активно используются в пищевой промышленности и могут употребляться как в свежем, так и в переработанном виде (соки, компоты, морсы, сиропы, чаи, варенья, джемы, добавки к мучным, кондитерским, консервированным изделиям и т. д.). Плоды и листья большинства лесных ягодных растений содержат целый ряд витаминов (A, B1, B2, B5, B6, С, PP, K1), а также микро- и микроэлементы, сахара, антоцианы, лейкоантоцианы, катехины, пектины, дубильные вещества, органические кислоты и другие соединения. Голубика особенно богата веществами Р-ви- таминного действия, участвующими в окислительно- восстановительных процессах, регулирующими работу желез внутренней секреции, обладающими противовоспалительным и противоопухолевым действием. В ягодах княженики содержится большое количество эллагитанина, препятствующего развитию вредных кишечных бактерий. Экстракты плодов клюквы оказывают антисептическое, гипотензивное и противоцинготное действие и обеспечивают проявление гемостатического эффекта, повышают уровень гемоглобина, поддерживают работу сердечно-сосудистой системы. Брусника содержит арбутин, урсоловую кислоту и широкий спектр других биологически активных веществ, повышающих ее лекарственную ценность. В плодах красники обнаружены вещества, обладающие гепатопротекторным действием. Обладая антиоксидантным, антибактериальным действием и другими лечебными свойствами, данные ягодные растения могут широко применяться в медицине при лечении множества заболеваний (атеросклероз, авитаминоз, гипертония, ревматизм, почечнокаменная болезнь, анемия, острые респираторные и простудные заболевания, бронхиальная астма, стоматиты, различные 1 All-Russian Research Institute for Silviculture and Mechanizati on of Forestry , Pushkino, Russia 2 Kostroma State Agricultural Academy , Karavaevo, Russia Received: April 28, 2021 Accepted in revised form: May 20, 2021 Accepted for publication: July 15, 2021 *е-mail: makarov_serg44@mail.ru © S.S. Makarov, S.A. Rodin, I.B. Kuznetsova, A.I. Chudetsky, S. Yu. Tsaregradskaya, 2021 Abstract. Introduction. Forest berry plants are popular on the food market and in pharmacy for their high nutritional and medicinal value. Plantations of forest berry plants can proliferate on unused lands, including depleted peatlands. Clonal micropropagation is the most effective method for obtaining large quantities of high quality planting material. Light-emitting diodes are highly effective for clonal micropropagation. The research objective was to study the effect of different spectral ranges on the process of root formation of forest berry plants in vitro. Study objects and methods. The research featured regenerant plants of half-highbush blueberry, arctic bramble, American cranberry, European cranberry, lingonberry, and Kamchatka bilberry of different cultivars. A set of experiments made it possible to study the effect of lighting type on the growth and development of the root system of forest berry plants in vitro using white fluorescent lamps, white spectrum LED lamps, and LED lamps with a combination of white, red, and blue spectra at the in vitro rooting stage of clonal micropropagation. Results and its discussion. The largest number (3.4–14.6 pcs.) and the maximum total length (10.0–156.9 cm) of roots were observed under LED lamps with a combination of white, red, and blue spectra. The effect was by 1.1–2.8 and 2.0–4.5 times higher than in the case of white-spectrum LED lamps, and by 2.3–7.0 and 3.3–14.9 times than in the case of fluorescent lamps. Variety and shape proved to have no significant effect on biome tric indicators. Conclusion. LED lamps had a positive effect on the process of rhizogenesis of forest berry plants during clonal micropropagation. They appeared to be more effective than fluorescent lamps. The combination of white, blue, and red spectra increased the biometric parameters of plants at the stage of in vitro rooting. Keywords. Clonal micropropagation, in vitro, root formation blueberry, arctic bramble, cranberry, lingonberry, Kamchatka bilberry, LED lamps, range Funding. The research was part of the State Task for Applied Scientific Research, Order of the Federal Forestry Agency of the Russian Federation No. 1061 (December 25, 2018). For citation: Makarov SS, Rodin SA, Kuznetsova IB, Chudetsky AI, Tsaregradskaya SYu. Effect of Light on Rhizogenesis of Forest Berry Plants during Clonal Micropropagation. Food Processing: Techniques and Technology. 2021;51(3):520–528. (In Russ.). https://doi.org/10.21603/2074-9414-2021-3-520-528. 522 Makarov S.S. et al. Food Processing: Techniques and Technology, 2021, vol. 51, no. 3, pp. 520–528 заболевания печени, желудка, мочеполовой системы, кожные болезни и др.). Кроме того, экстракты данных растений применяют в косметологии, народной медицине, а декоративные посадки некоторых ягодных культур успешно используются в ландшафтном дизайне [1–12]. В связи с усилением антропогенного влияния естественные запасы данных видов, особенно имеющих ограниченный ареал произрастания (а в некоторых районах являющихся редкими и исчезающими), резко снижаются. Особое значение приобретает выращивание посадочного материала хозяйственно ценных лесных ягодных растений для культивирования их в промышленных масштабах. Создание плантаций востребованных видов ягодников позволит не только существенно восполнить их ресурсы, увеличить биологическое разнообразие природной среды и удовлетворить спрос потребителей, но также предотвратить разрушение экосистем при рекультивации данными посадками неиспользуемых, вышедших из промышленного оборота земель. В том числе выработанных торфяных месторождений, которые имеют наиболее подходящие условия для произрастания многих таежных и болотных видов [13]. Для получения большого количества высо- кокачественного посадочного материала ягодных растений наиболее целесообразным является использование современных биотехнологических методов размножения с помощью культуры клеток и тканей. Например, клональное микроразмножение. Данный метод позволяет в короткие сроки и круглогодично получать значительное количество оздоровленных растений (включая виды, плохо размножаемые с помощью традиционных способов), а также является менее трудозатрадным и экономически эффективным [14]. Выращиванием перспективных сортов и форм хозяйственно ценных лесных ягодных растений (голубика узколистная (Vaccinium angustifolium Ait.), голубика полувысокорослая (Vaccinium corymbosum L. × Vaccinium angustifolium Ait.), княженика арктическая (Rubus arcticus L.), клюква крупноплодная (Oxycoccus мacrocarpus Pers.), клюква болотная (Oxycoccus palustris Pers.), брусника обыкновенная (Vaccinium vitis-idaea L.), красника (Vaccinium praestans Lamb.), жимолость съедобная (Lonicera edulis Turcz.), морошка приземистая (Rubus chamaemorus L.) и др.) в культуре in vitro с 2015 г. занимаются в филиале ФБУ ВНИИЛМ «Центрально-европейская лесная опытная станция» [15–18]. Свет является важнейшим условием для жизнедеятельности растений, дающим энергию для процесса фотосинтеза. При подборе оптимальных источников освещения для расте- ний как в научных исследованиях, так и при работе на сельскохозяйственных предприятиях предпочтительнее становится использование белых светодиодов с излучением, содержащим компоненты всех основных полос в диапазоне фотосинтетически активной радиации (ФАР). При этом спектральный состав по-разному оказывает влияние на рост и развитие растений, а различные участки спектрального диапазона имеют разное воздействие на регуляцию морфогенетических и физиологических процессов в растениях. Кроме того, применение белых светодиодов не ограничивается только белым спектром. Их можно использовать в комбинациях с узкополосными красными и синими светодиода- ми [19–21]. В связи с тем, что на сегодняшний день не так много исследований, посвященных изучению влияния типа освещения на органогенез лесных ягодных растений в культуре in vitro, эксперименты в данном направлении представляют как теоретическую, так и практическую ценность. Цель исследования – изучение влияния типа освещения на процесс ризогенеза лесных ягодных растений при клональном микроразмножении. Объекты и методы исследования Исследования по выращиванию лесных ягодных растений в культуре in vitro проводили в лаборатории клонального микроразмножения растений на базе филиала ФБУ ВНИИЛМ «Центрально-европейская лесная опытная станция» в 2016–2020 гг. В качестве объектов исследования использова- лись растения голубики полувысокорослой (сорт «Нортблю» и гибридная форма 23-1-11), княженики арктической (сорт «Анна» и гибридная форма К-1), клюквы крупноплодной (сорт «Бен Лир» и гибридная форма 1-23-3), клюквы болотной (сорт «Дар Костромы» и гибридная форма 1-15-635), брусники обыкновенной (сорта «Рубин» и «Костромская розовая»), красники (Курильская и Сахалинская формы). Растения голубики, клюквы и красники культивировали на питательной среде WPM (Wood Plant Medium), княженики – на питательной среде MS (Мурасиге-Скуга), брусники – на питательной среде Андерсона в условиях световой комнаты при температуре от +23 до +25 °C, влажности 75–80 % и фотопериоде 16/8 ч. На этапе «собственно микроразмножение» применяли регуляторы роста цитокининовой группы: при выращивании голубики, клюквы, брусники и красники – 2-изопенталаденин (2ip) в концентрациях 1,0–5,0 мл/л; при выращивании княженики – 6-бензиламинопурил (6-БАП) в концентрации 0,5 мл/л. На этапе укоренения in vitro использовали регуляторы роста ауксиновой группы. При выращивании голубики, клюквы, брусники и красники – индолилуксусная кислота (ИУК) в концентрации 0,5–1,0 мл/л; при выращивании княженики – индолилмасляная кислота (ИМК) в концентрации 0,5 мл/л. 523 Макаров С. С. [и др.] Техника и технология пищевых производств. 2021. Т. 51. № 3 С. 520–528 При изучении влияния света на рост и развитие размножаемых растений использовали лампы различного спектрального состава: 1) ЛБ – люми- несцентные лампы белого цвета (λ = 600 нм); 2) СД-Б – светодиодные лампы белого спектра (λ = 653 нм); 3) СД-Б+К+С – светодиодные лампы с комбинацией белого (λ = 653 нм), красного (λ = 670 нм) и синего (λ = 455 нм) спектров (рис. 1). Пробирки с растениями-регенерантами размещали в штативах из пенопласта, закрывающих от света корневую систему, и подвергали постоянному освещению. Учитывали количество, среднюю и суммарную длину корней в расчете на одно растение. Опыты проводили в 10-кратной биологической и 2-кратной аналитической повторностях. Статистическую обработку данных проводили при помощи программного обеспечения Microsoft Office 2016 и AGROS v.2.11. Применяли дисперсионный двухфакторный анализ, где фактор A – сорт или форма, фактор B – тип освещения. Достоверность различий между средними данными вариантов опыта оценивали с помощью наименьшей существенной разности для 5 %-го уровня значимости (НСР 05). Результаты и их обсуждение В результате проведенных экспериментальных исследований выявлено, что при клональном микроразмножении на этапе укоренения in vitro наибольшее количество корней (в среднем 9,9 шт.) голубики полувысокорослой формировалось при освещении надземной части лампами СД-Б+К+С. Оно было в 2,8 раза больше, чем при освещении лампами СД-Б, и в 4,5 раза больше, чем при освещении ЛБ (табл. 1). Наибольшая суммарная длина (в среднем 114,8 см) корней голубики была отмечена также при освещении надземной части лампами СД-Б+К+С и была в 7 раз больше, чем при освещении СД-Б, и в 14,9 раза больше, чем при освещении лампами ЛБ (табл. 2). Существенных различий биометрических показателей по сортам не выявлено. Наибольшее количество корней (в среднем 13,4 шт.) растений-регенерантов княженики аркти- ческой было отмечено при использовании ламп СД-Б+К+С. Оно было в 2,2 раза больше, чем в варианте освещения лампами СД-Б, и в 4,5 раза больше, чем при освещении ЛБ (табл. 3). Количество корней, в зависимости от сорта, не имело значительных различий. Суммарная длина корней растений княженики также была максимальной (в среднем 163,8 см) при использованием ламп СД-Б+К+С, что в 3,3 и 10,1 раза больше, чем при освещении лампами СД-Б и ЛБ соответственно (табл. 4). a b Рисунок 1. Освещение регенерантов лесных ягодных растений свето диодными лампами: a – белого спектра; b – с комбинацией белого, красного и синего спектров Figure 1. Forest berry plant regenerants under LED lamps: a – w hite spectrum; b – combination of white, red, and blue spectra 524 Makarov S.S. et al. Food Processing: Techniques and Technology, 2021, vol. 51, no. 3, pp. 520–528 При этом суммарная длина корней у растений гибридной формы К-1 имела в 1,2 раза больше значение, чем у сорта «Анна» (рис. 2). При укоренении растений-регенерантов клюквы крупноплодной и клюквы болотной формирование наибольшего количества корней (в среднем 13,9– 14,6 шт.) наблюдалось при освещении лампами СД-Б+К+С. Это в 2,1–2,3 больше, чем при освещении СД-Б, и в 2,4–2,6 раза больше, чем при освещении ЛБ (табл. 5). Различия по количеству корней, в Таблица 3. Количество корней княженики арктической в зависимости от сорта и типа освещения надземной части Table 3. Number of roots of Rubus arcticus L., depending on variety and light Сорт Освещение Среднее ЛБ СД-Б СД-Б+К+С «Анна», шт 2,8 6,5 12,7 7,3 Гибридная форма К-1, шт 3,2 5,7 14,0 7,6 Среднее, шт 3,0 6,1 13,4 – НCР05 фактор А = 1,40, фактор В = 1,13, общ. = 2,10 Таблица 4. Суммарная длина корней княженики арктической в зависимости от сорта и типа освещения надземной части Table 4. Total length of the roots of Rubus arcticus L., depending on variety and light Сорт Освещение Среднее ЛБ СД-Б СД-Б+К+С «Анна», см 13,6 52,6 139,7 68,6 Гибридная форма К-1, см 17,1 48,2 187,9 84,4 Среднее, см 15,4 50,4 163,8 – НCР05 фактор А = 3,95, фактор В = 4,30, общ. = 6,81 a b с Рисунок 2. Корнеобразование in vitro растений княженики арктической сорта «Анна» ( 1) и гибридной формы К-1 ( 2) при освещении лампами: а – ЛБ; b – СД-Б; c – СД-Б+К+С Figure 2. Root formation in vitro of Rubus arcticus L. cultivar Anna ( 1) and hybrid K-1 ( 2) under a – white fluorescent lamps; b – white spectrum LED lamps; c – LED lamps with a combination of white, red, and blue spectra Таблица 1. Количество корней голубики полувысокорослой в зависимости от сорта и условий освещения надземной части Table 1. Number of roots of Vaccinium corymbosum L. × Vaccinium angustifolium Ait., depending on variety and light Сорт Освещение Среднее ЛБ СД-Б СД-Б+К+С «Нортблю», шт 2,1 3,4 9,7 5,1 Гибридная форма 23-1-11, шт 2,2 3,7 10,0 5,3 Среднее, шт 2,2 3,6 9,9 – НCР05 фактор А = 1,20, фактор В = 1,03, общ. = 2,02 Таблица 2. Суммарная длина корней голубики полувысокорослой в зависимости от сорта и условий освещения надземной части Table 2. Total length of roots of Vaccinium corymbosum L. × Vaccinium angustifolium Ait., depending on variety and light Сорт Освещение Среднее ЛБ СД-Б СД-Б+К+С «Нортблю», см 8,1 16,3 115,5 46,6 Гибридная форма 23-1-11, см 7,3 16,4 114,1 45,9 Среднее, см 7,7 16,4 114,8 – НCР05 фактор А = 3,85, фактор В = 4,10, общ. = 3,91 525 Макаров С. С. [и др.] Техника и технология пищевых производств. 2021. Т. 51. № 3 С. 520–528 зависимости от сорта, у обоих видов клюквы были незначительны. Максимальная суммарная длина корней клюквы крупноплодной и клюквы болотной (в среднем 133,6–156,9 см) отмечена при освещении надземной части лампами СД-Б+К+С и была в 2,6–3,1 раза больше, чем в варианте освещения СД-Б, и в 3,3– 3,8 раза больше, чем при освещении лампами ЛБ (табл. 6). При этом при освещении лампами СД-Б+К+С суммарная длина корней клюквы крупноплодной и клюквы болотной гибридных форм была в 1,2– 1,3 раза больше, чем у растений сортов «Бен Лир» и «Дар Костромы» соответственно. При укоренении растений-регенерантов брусни- ки обыкновенной освещение надземной части лампами СД-Б+К+С способствовало формированию наибольшего количества корней (в среднем 3,9 шт.), что в 1,6 и 2,4 раза больше, чем при освещении лампами СД-Б и ЛБ соответственно (табл. 7). В зависимости от сорта существенных различий по количеству корней не отмечено. Суммарная длина корней брусники была максимальной (в среднем 15,5 см) при освещении надземной части лампами СД-Б+К+С и была 3,5 и 8,6 раза больше, чем при использовании освещения СД-Б и ЛБ соответственно (табл. 8). При этом у растений сорта «Костромская розовая» суммарная длина корней в 1,5 раза превышала показатель сорта «Рубин». Наибольшее количество корней у растений красники (в среднем 3,4 шт.) наблюдалось при освещении наземной части лампами СД-Б+К+С и было в 1,1 и 2,0 раза больше, чем в вариантах освещения лампами СД-Б и ЛБ соответственно (табл. 9). Суммарная длина корней красники была также максимальной (в среднем 10,0 см) при освещении надземной части растений лампами СД-Б+К+С, что в 2,3 раза больше, чем при освещении лампами СД-Б, и в 4,6 раза больше, чем при освещении ЛБ (табл. 10). Существенных различий биометрических показателей растений красники по количеству и Таблица 5. Количество корней клюквы в зависимости от сорта и спектрального диапазона освещения надземной части Table 5. Number of roots of Oxycoccus, depending on variety and spectrum Сорт Освещение Среднее ЛБ СД-Б СД-Б+К+С Клюква крупноплодная «Бен Лир», шт 6,0 7,1 13,1 8,7 Гибридная форма 1-23-3, шт 6,3 6,9 16,0 9,7 Среднее, шт 6,2 7,0 14,6 – НCР05 фактор А = 1,91, фактор В = 1,72, общ. = 2,53 Клюква болотная «Дар Костромы», шт 5,9 6,5 12,3 8,2 Гибридная форма 1-15-635, шт 4,8 5,7 15,4 8,6 Среднее, шт 5,4 6,1 13,9 – НCР05 фактор А = 1,49, фактор В = 1,31, общ. = 2,21 Таблица 6. Суммарная длина корней клюквы в зависимости от сорта и спектрального диапазона освещения надземной части Table 6. Total length of roots of Oxycoccus, depending on variety and spectrum Сорт Освещение Среднее ЛБ СД-Б СД-Б+К+С Клюква крупноплодная «Бен Лир», см 39,9 50,8 122,1 70,9 Гибридная форма 1-23-3, см 40,3 52,3 145,0 79,2 Среднее, см 40,1 51,6 133,6 – НCР05 фактор А = 4,73, фактор В = 5,11, общ. = 3,62 Клюква болотная «Дар Костромы», см 46,6 55,2 141,2 81,0 Гибридная форма 1-15-635, см 36,5 46,7 172,6 85,3 Среднее, см 41,6 51,0 156,9 – НCР05 фактор А = 4,89, фактор В = 5,42, общ. = 3,91 Таблица 7. Количество корней брусники обыкновенной в зависимости от сорта и типа освещения надземной части Table 7. Number of roots of Vaccinium vitis-idaea L., depending on variety and light Сорт Освещение Среднее ЛБ СД-Б СД-Б+К+С «Костромская розовая», шт 1,8 2,5 4,5 2,9 «Рубин», шт 1,3 2,3 3,2 2,3 Среднее, шт 1,6 2,4 3,9 – НCР05 фактор А = 1,67 фактор, В = 1,44, общ. = 2,33 Таблица 8. Суммарная длина корней брусники обыкновенной в зависимости от сорта и типа освещения надземной части Table 8. Total length of roots of Vaccinium vitis-idaea L., depending on variety and light Сорт Освещение Среднее ЛБ СД-Б СД-Б+К+С «Костромская розовая», см 2,6 4,6 18,5 8,6 «Рубин», см 1,0 4,2 12,5 5,9 Среднее, см 1,8 4,4 15,5 – НCР05 фактор А = 1,97, фактор В = 1,65, общ. = 2,41 526 Makarov S.S. et al. Food Processing: Techniques and Technology, 2021, vol. 51, no. 3, pp. 520–528 суммарной длине корней, в зависимости от формы, не выявлено. Выводы По результатам проведенных экспериментальных исследований установлено, что при клональном микроразмножении лесных ягодных растений (голубика полувысокорослая, княженика арктическая, клюква крупноплодная, клюква болотная, брусника обыкновенная, красника) перспективных сортов и форм наибольшее количество корней (3,4– 14,6 шт.) максимальной длины (10,0–156,9 см) формировалось при освещении надземной части растений-регенерантов светодиодными лампами с комбинацией белого, красного и синего спектров. При этом в большинстве вариантов не наблюдалось существенных различий по биометрическим показателям в зависимости от сорта или формы. Однако суммарная длина корней растений княженики арктической, клюквы крупноплодной и клюквы болотной гибридных форм имела показатели в 1,2–1,3 больше, чем у растений сравниваемых сортов. Таким образом, при клональном микроразмно- жении целесообразно применение светодиодных ламп. Это способствует лучшему протеканию процесса ризогенеза лесных ягодных растений по сравнению с освещением люминесцентными лампами. При использовании комбинации белого, синего и красного спектров на этапе укоренения растений в культуре in vitro биометрические показатели значительно увеличиваются. Критерии авторства С. С. Макаров руководил проектом, проводил закладку лабораторного опыта на всех этапах клонального микроразмножения, проводил анализ литературных источников по вопросу использования биотехнологических способов размножения лесных ягодных растений. С. А. Родин и С. Ю. Цареградская проводили анализ литературных источников по вопросу актуальности использования и хозяйственной ценности лесных ягодных растений. И. Б. Кузнецова проводила закладку лабораторного опыта на этапе укоренения растений in vitro, проводила статистическую обработку данных. А. И. Чудецкий проводил статистическую обработку данных. Конфликт интересов Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов. Благодарности Выражаем благодарность канд. биол. наук Г. В. Тяк, канд. биол. наук Г. Ю. Макеевой, канд. с.-х. наук И. А. Кореневу, канд. биол. наук Л. Е. Курлович, А. В. Тяку, В. А. Макееву. Contribution S.S. Makarov supervised the project, conducted the initial stage of laboratory experiments, and reviewed the literature on biotechnological methods of propagation of forest berry plants. S.A. Rodin and S.Yu. Tsaregradskaya reviewed publications on the relevance and economic value of forest berry plants. I.B. Kuznetsova performed laboratory experiments at the stage of plant rooting and processed statistical data. A.I. Chudetsky was responsible for statistical data processing. Conflict of interest The authors declare that there is no conflict of interest regarding the publication of this article. Acknowledgments The authors express our gratitude to G.V. Tyak, Сand.Sci.(Biol.), G.Yu. Makeeva, Сand.Sci.(Biol.), I.A. Korenev, Сand.Sci.(Agri.), L.E. Kurlovich, Сand.Sci. (Biol.), A.V. Tyak, Сand.Sci.(Biol.), and V.A. Makeev, Сand.Sci.(Biol.). |
|
Рисунок 1. Освещение регенерантов лесных ягодных растений светодиодными лампами:
a – белого спектра; b – с комбинацией белого, красного и синего спектров
Figure 1. Forest berry plant regenerants under LED lamps:
a – white spectrum; b – combination of white, red, and blue spectra
Статистическую обработку данных проводили при помощи программного обеспечения Microsoft Office 2016 и AGROS v.2.11. Применяли дисперсионный двухфакторный анализ, где фактор A – сорт или форма, фактор B – тип освещения. Достоверность различий между средними данными вариантов опыта оценивали с помощью наименьшей существенной разности для 5 %-го уровня значимости (НСР05).
Результаты и их обсуждение
В результате проведенных экспериментальных исследований выявлено, что при клональном микроразмножении на этапе укоренения in vitro наибольшее количество корней (в среднем 9,9 шт.) голубики полувысокорослой формировалось при освещении надземной части лампами СД-Б+К+С. Оно было в 2,8 раза больше, чем при освещении лампами СД-Б, и в 4,5 раза больше, чем при освещении ЛБ (табл. 1).
Таблица 1. Количество корней голубики полувысокорослой в зависимости от сорта и условий освещения
надземной части, шт.
Table 1. Number of roots of Vaccinium corymbosum L. × Vaccinium angustifolium Ait., depending on variety and light, pcs.
|
Сорт |
Освещение |
Среднее |
||
|
ЛБ |
СД-Б |
СД-Б+К+С |
||
|
«Нортблю» |
2,1 |
3,4 |
9,7 |
5,1 |
|
Гибридная форма 23-1-11 |
2,2 |
3,7 |
10,0 |
5,3 |
|
Среднее |
2,2 |
3,6 |
9,9 |
– |
|
НCР05 фактор А = 1,20, фактор В = 1,03, общ. = 2,02 |
||||
Наибольшая суммарная длина (в среднем 114,8 см) корней голубики была отмечена также при освещении надземной части лампами СД-Б+К+С и была в 7 раз больше, чем при освещении СД-Б, и в 14,9 раза больше, чем при освещении лампами ЛБ (табл. 2). Существенных различий биометрических показателей по сортам не выявлено.
Таблица 2. Суммарная длина корней голубики полувысокорослой в зависимости от сорта и условий освещения
надземной части, см
Table 2. Total length of roots of Vaccinium corymbosum L. × Vaccinium angustifolium Ait., depending on variety and light, cm
|
Сорт |
Освещение |
Среднее |
||
|
ЛБ |
СД-Б |
СД-Б+К+С |
||
|
«Нортблю» |
8,1 |
16,3 |
115,5 |
46,6 |
|
Гибридная форма 23-1-11 |
7,3 |
16,4 |
114,1 |
45,9 |
|
Среднее |
7,7 |
16,4 |
114,8 |
– |
|
НCР05 фактор А = 3,85, фактор В = 4,10, общ. = 3,91 |
||||
Наибольшее количество корней (в среднем 13,4 шт.) растений-регенерантов княженики арктической было отмечено при использовании ламп СД-Б+К+С. Оно было в 2,2 раза больше, чем в варианте освещения лампами СД-Б, и в 4,5 раза больше, чем при освещении ЛБ (табл. 3). Количество корней, в зависимости от сорта, не имело значительных различий.
Таблица 3. Количество корней княженики арктической в зависимости от сорта и типа освещения надземной части, шт.
Table 3. Number of roots of Rubus arcticus L., depending on variety and light, pcs.
|
Сорт |
Освещение |
Среднее |
||
|
ЛБ |
СД-Б |
СД-Б+К+С |
||
|
«Анна» |
2,8 |
6,5 |
12,7 |
7,3 |
|
Гибридная форма К-1 |
3,2 |
5,7 |
14,0 |
7,6 |
|
Среднее |
3,0 |
6,1 |
13,4 |
– |
|
НCР05 фактор А = 1,40, фактор В = 1,13, общ. = 2,10 |
||||
Суммарная длина корней растений княженики также была максимальной (в среднем 163,8 см) при использованием ламп СД-Б+К+С, что в 3,3 и 10,1 раза больше, чем при освещении лампами СД-Б и ЛБ соответственно (табл. 4).
Таблица 4. Суммарная длина корней княженики арктической в зависимости от сорта и типа освещения надземной части, см
Table 4. Total length of the roots of Rubus arcticus L., depending on variety and light, cm
|
Сорт |
Освещение |
Среднее |
||
|
ЛБ |
СД-Б |
СД-Б+К+С |
||
|
«Анна» |
13,6 |
52,6 |
139,7 |
68,6 |
|
Гибридная форма К-1 |
17,1 |
48,2 |
187,9 |
84,4 |
|
Среднее |
15,4 |
50,4 |
163,8 |
– |
|
НCР05 фактор А = 3,95, фактор В = 4,30, общ. = 6,81 |
||||
При этом суммарная длина корней у растений гибридной формы К-1 имела в 1,2 раза больше значение, чем у сорта «Анна» (рис. 2).
Рисунок 2. Корнеобразование in vitro растений княженики арктической сорта «Анна» (1) и гибридной формы К-1 (2) при освещении лампами: а – ЛБ; b – СД-Б; c – СД-Б+К+С
Figure 2. Root formation in vitro of Rubus arcticus L. cultivar Anna (1) and hybrid K-1 (2) under a – white fluorescent lamps; b – white spectrum LED lamps; c – LED lamps with a combination of white, red, and blue spectra
В рисунке: заменить а, б, в на а, b, c
При укоренении растений-регенерантов клюквы крупноплодной и клюквы болотной формирование наибольшего количества корней (в среднем 13,9–14,6 шт.) наблюдалось при освещении лампами СД-Б+К+С. Это в 2,1–2,3 больше, чем при освещении СД-Б, и в 2,4–2,6 раза больше, чем при освещении ЛБ (табл. 5). Различия по количеству корней, в зависимости от сорта, у обоих видов клюквы были незначительны.
Таблица 5. Количество корней клюквы болотной в зависимости от сорта и спектрального диапазона освещения
надземной части, шт.
Table 5. Number of roots of Oxycoccus palustris Pers., depending on variety and spectrum, pcs.
|
Сорт |
Освещение |
Среднее |
||
|
ЛБ |
СД-Б |
СД-Б+К+С |
||
|
Клюква крупноплодная |
||||
|
«Бен Лир» |
6,0 |
7,1 |
13,1 |
8,7 |
|
Гибридная форма 1-23-3 |
6,3 |
6,9 |
16,0 |
9,7 |
|
Среднее |
6,2 |
7,0 |
14,6 |
– |
|
НCР05 фактор А = 1,91, фактор В = 1,72, общ. = 2,53 |
||||
|
Клюква болотная |
||||
|
«Дар Костромы» |
5,9 |
6,5 |
12,3 |
8,2 |
|
Гибридная форма 1-15-635 |
4,8 |
5,7 |
15,4 |
8,6 |
|
Среднее |
5,4 |
6,1 |
13,9 |
– |
|
НCР05 фактор А = 1,49, фактор В = 1,31, общ. = 2,21 |
||||
Максимальная суммарная длина корней клюквы крупноплодной и клюквы болотной (в среднем 133,6–156,9 см) отмечена при освещении надземной части лампами СД-Б+К+С и была в 2,6–3,1 раза больше, чем в варианте освещения СД-Б, и в 3,3–3,8 раза больше, чем при освещении лампами ЛБ (табл. 6). При этом при освещении лампами СД-Б+К+С суммарная длина корней клюквы крупноплодной и клюквы болотной гибридных форм была в 1,2–1,3 раза больше, чем у растений сортов «Бен Лир» и «Дар Костромы» соответственно.
Таблица 6. Суммарная длина корней клюквы болотной в зависимости от сорта и спектрального диапазона освещения надземной части, см
Table 6. Total length of roots of Oxycoccus palustris Pers., depending on variety and spectrum, cm
|
Сорт |
Освещение |
Среднее |
||
|
ЛБ |
СД-Б |
СД-Б+К+С |
||
|
Клюква крупноплодная |
||||
|
«Бен Лир» |
39,9 |
50,8 |
122,1 |
70,9 |
|
Гибридная форма 1-23-3 |
40,3 |
52,3 |
145,0 |
79,2 |
|
Среднее |
40,1 |
51,6 |
133,6 |
– |
|
НCР05 фактор А = 4,73, фактор В = 5,11, общ. = 3,62 |
||||
|
Клюква болотная |
||||
|
«Дар Костромы» |
46,6 |
55,2 |
141,2 |
81,0 |
|
Гибридная форма 1-15-635 |
36,5 |
46,7 |
172,6 |
85,3 |
|
Среднее |
41,6 |
51,0 |
156,9 |
– |
|
НCР05 фактор А = 4,89, фактор В = 5,42, общ. = 3,91 |
||||
При укоренении растений-регенерантов брусники обыкновенной освещение надземной части лампами СД-Б+К+С способствовало формированию наибольшего количества корней (в среднем 3,9 шт.), что в 1,6 и 2,4 раза больше, чем при освещении лампами СД-Б и ЛБ соответственно (табл. 7). В зависимости от сорта существенных различий по количеству корней не отмечено.
Таблица 7. Количество корней брусники обыкновенной зависимости от сорта и типа освещения надземной части, шт.
Table 7. Number of roots of Vaccinium vitis-idaea L., depending on variety and light, pcs.
|
Сорт |
Освещение |
Среднее |
||
|
ЛБ |
СД-Б |
СД-Б+К+С |
||
|
«Костромская розовая» |
1,8 |
2,5 |
4,5 |
2,9 |
|
«Рубин» |
1,3 |
2,3 |
3,2 |
2,3 |
|
Среднее |
1,6 |
2,4 |
3,9 |
– |
|
НCР05 фактор А = 1,67 фактор, В = 1,44, общ. = 2,33 |
||||
Суммарная длина корней брусники была максимальной (в среднем 15,5 см) при освещении надземной части лампами СД-Б+К+С и была 3,5 и 8,6 раза больше, чем при использовании освещения СД-Б и ЛБ соответственно (табл. 8). При этом у растений сорта «Костромская розовая» суммарная длина корней в 1,5 раза превышала показатель сорта «Рубин».
Таблица 8. Суммарная длина корней брусники обыкновенной в зависимости от сорта и типа освещения надземной части, см
Table 8. Total length of roots of Vaccinium vitis-idaea L., depending on variety and light, cm
|
Сорт |
Освещение |
Среднее |
||
|
ЛБ |
СД-Б |
СД-Б+К+С |
||
|
«Костромская розовая» |
2,6 |
4,6 |
18,5 |
8,6 |
|
«Рубин» |
1,0 |
4,2 |
12,5 |
5,9 |
|
Среднее |
1,8 |
4,4 |
15,5 |
– |
|
НCР05 фактор А = 1,97, фактор В = 1,65, общ. = 2,41 |
||||
Наибольшее количество корней у растений красники (в среднем 3,4 шт.) наблюдалось при освещении наземной части лампами СД-Б+К+С и было в 1,1 и 2,0 раза больше, чем в вариантах освещения лампами СД-Б и ЛБ соответственно (табл. 9).
Таблица 9. Количество корней красники зависимости от формы и типа освещения надземной части, шт.
Table 9. Number of roots of Vaccinium praestans Lamb., depending on shape and light, pcs.
|
Форма |
Вариант освещения |
Среднее |
||
|
ЛБ |
СД-Б |
СД-Б+К+С |
||
|
Сахалинская |
1,5 |
2,7 |
3,2 |
2,5 |
|
Курильская |
1,8 |
3,3 |
3,5 |
2,7 |
|
Среднее |
1,7 |
3,0 |
3,4 |
– |
|
НCР05 фактор А = 0,87, фактор В = 0,64, общ. = 1,03 |
||||
Суммарная длина корней красники была также максимальной (в среднем 10,0 см) при освещении надземной части растений лампами СД-Б+К+С, что в 2,3 раза больше, чем при освещении лампами СД-Б, и в 4,6 раза больше, чем при освещении ЛБ (табл. 10).
Таблица 10. Суммарная длина корней красники в зависимости от формы и типа освещения надземной части, см
Table 10. Total length of roots of Vaccinium praestans Lamb., depending on shape and light, cm
|
Форма |
Вариант освещения |
Среднее |
||
|
ЛБ |
СД-Б |
СД-Б+К+С |
||
|
Сахалинская |
1,8 |
4,1 |
9,3 |
5,1 |
|
Курильская |
2,5 |
4,6 |
10,8 |
6,0 |
|
Среднее |
2,2 |
4,4 |
10,0 |
– |
|
НCР05 фактор А = 1,75, фактор В = 1,35, общ. = 2,31 |
||||
Существенных различий биометрических показателей растений красники по количеству и суммарной длине корней, в зависимости от формы, не выявлено.
Выводы
По результатам проведенных экспериментальных исследований установлено, что при клональном микроразмножении лесных ягодных растений (голубика полувысокорослая, княженика арктическая, клюква крупноплодная, клюква болотная, брусника обыкновенная, красника) перспективных сортов и форм наибольшее количество корней (3,4–14,6 шт.) максимальной длины (10,0–156,9 см) формировалось при освещении надземной части растений-регенерантов светодиодными лампами с комбинацией белого, красного и синего спектров. При этом в большинстве вариантов не наблюдалось существенных различий по биометрическим показателям в зависимости от сорта или формы. Однако суммарная длина корней растений княженики арктической, клюквы крупноплодной и клюквы болотной гибридных форм имела показатели в 1,2–1,3 больше, чем у растений сравниваемых сортов.
Таким образом, при клональном микроразмножении целесообразно применение светодиодных ламп. Это способствует лучшему протеканию процесса ризогенеза лесных ягодных растений по сравнению с освещением люминесцентными лампами. При использовании комбинации белого, синего и красного спектров на этапе укоренения растений в культуре in vitro биометрические показатели значительно увеличиваются.
Критерии авторства
С. С. Макаров руководил проектом, проводил закладку лабораторного опыта на всех этапах клонального микроразмножения, проводил анализ литературных источников по вопросу использования биотехнологических способов размножения лесных ягодных растений. С. А. Родин и С. Ю. Цареградская проводили анализ литературных источников по вопросу актуальности использования и хозяйственной ценности лесных ягодных растений. И. Б. Кузнецова проводила закладку лабораторного опыта на этапе укоренения растений in vitro, проводила статистическую обработку данных. А. И. Чудецкий проводил статистическую обработку данных.
Конфликт интересов
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Благодарности
Выражаем благодарность канд. биол. наук Г. В. Тяк, канд. биол. наук Г. Ю. Макеевой, канд. с.-х. наук И. А. Кореневу, канд. биол. наук Л. Е. Курлович, А. В. Тяку, В. А. Макееву.
Contribution
S.S. Makarov supervised the project, conducted the initial stage of laboratory experiments, and reviewed the literature on biotechnological methods of propagation of forest berry plants. S.A. Rodin and S.Yu. Tsaregradskaya reviewed publications on the relevance and economic value of forest berry plants. I.B. Kuznetsova performed laboratory experiments at the stage of plant rooting and processed statistical data. A.I. Chudetsky was responsible for statistical data processing.
Conflict of interest
The authors declare that there is no conflict of interest regarding the publication of this article.
Acknowledgments
The authors express our gratitude to G.V. Tyak, Сand.Sci. (Biol.), G.Yu. Makeeva, Сand.Sci. (Biol.), I.A. Korenev, Сand.Sci. (Agri.), L.E. Kurlovich, Сand.Sci. (Biol.), A.V. Tyak, Сand.Sci. (Biol.), and V.A. Makeev, Сand.Sci. (Biol.).
Введение
В настоящее время во всем мире возрастает спрос на продукцию лесных ягодных растений, обладающих высокой пищевой и лекарственной ценностью, таких как клюква, голубика, брусника, черника, княженика, морошка, красника и др. Ягоды активно используются в пищевой промышленности и могут употребляться как в свежем, так и в переработанном виде (соки, компоты, морсы, сиропы, чаи, варенья, джемы, добавки к мучным, кондитерским, консервированным изделиям и т. д.). Плоды и листья большинства лесных ягодных растений содержат целый ряд витаминов (A, B1, B2, B5, B6, С, PP, K1), а также микро- и микроэлементы, сахара, антоцианы, лейкоантоцианы, катехины, пектины, дубильные вещества, органические кислоты и другие соединения.
Голубика особенно богата веществами Р-витаминного действия, участвующими в окислительно-восстановительных процессах, регулирующими работу желез внутренней секреции, обладающими противовоспалительным и противоопухолевым действием. В ягодах княженики содержится большое количество эллагитанина, препятствующего развитию вредных кишечных бактерий. Экстракты плодов клюквы оказывают антисептическое, гипотензивное и противоцинготное действие и обеспечивают проявление гемостатического эффекта, повышают уровень гемоглобина, поддерживают работу сердечно-сосудистой системы. Брусника содержит арбутин, урсоловую кислоту и широкий спектр других биологически активных веществ, повышающих ее лекарственную ценность. В плодах красники обнаружены вещества, обладающие гепатопротекторным действием.
Обладая антиоксидантным, антибактериальным действием и другими лечебными свойствами, данные ягодные растения могут широко применяться в медицине при лечении множества заболеваний (атеросклероз, авитаминоз, гипертония, ревматизм, почечнокаменная болезнь, анемия, острые респираторные и простудные заболевания, бронхиальная астма, стоматиты, различные заболевания печени, желудка, мочеполовой системы, кожные болезни и др.). Кроме того, экстракты данных растений применяют в косметологии, народной медицине, а декоративные посадки некоторых ягодных культур успешно используются в ландшафтном дизайне [1–12].
В связи с усилением антропогенного влияния естественные запасы данных видов, особенно имеющих ограниченный ареал произрастания (а в некоторых районах являющихся редкими и исчезающими), резко снижаются. Особое значение приобретает выращивание посадочного материала хозяйственно ценных лесных ягодных растений для культивирования их в промышленных масштабах. Создание плантаций востребованных видов ягодников позволит не только существенно восполнить их ресурсы, увеличить биологическое разнообразие природной среды и удовлетворить спрос потребителей, но также предотвратить разрушение экосистем при рекультивации данными посадками неиспользуемых, вышедших из промышленного оборота земель. В том числе выработанных торфяных месторождений, которые имеют наиболее подходящие условия для произрастания многих таежных и болотных видов [13].
Для получения большого количества высококачественного посадочного материала ягодных растений наиболее целесообразным является использование современных биотехнологических методов размножения с помощью культуры клеток и тканей. Например, клональное микроразмножение. Данный метод позволяет в короткие сроки и круглогодично получать значительное количество оздоровленных растений (включая виды, плохо размножаемые с помощью традиционных способов), а также является менее трудозатрадным и экономически эффективным [14].
Выращиванием перспективных сортов и форм хозяйственно ценных лесных ягодных растений (голубика узколистная (Vaccinium angustifolium Ait.), голубика полувысокорослая (Vaccinium corymbosum L. × Vaccinium angustifolium Ait.), княженика арктическая (Rubus arcticus L.), клюква крупноплодная (Oxycoccus мacrocarpus Pers.), клюква болотная (Oxycoccus palustris Pers.), брусника обыкновенная (Vaccinium vitis-idaea L.), красника (Vaccinium praestans Lamb.), жимолость съедобная (Lonicera edulis Turcz.), морошка приземистая (Rubus chamaemorus L.) и др.) в культуре in vitro с 2015 года занимаются в филиале ФБУ ВНИИЛМ «Центрально-европейская лесная опытная станция» [15–18].
Свет является важнейшим условием для жизнедеятельности растений, дающим энергию для процесса фотосинтеза. При подборе оптимальных источников освещения для растений как в научных исследованиях, так и при работе на сельскохозяйственных предприятиях более предпочтительнее становится использование белых светодиодов с излучением, содержащим компоненты всех основных полос в диапазоне фотосинтетически активной радиации (ФАР). При этом спектральный состав по-разному оказывает влияние на рост и развитие растений, а различные участки спектрального диапазона имеют разное воздействие на регуляцию морфогенетических и физиологических процессов в растениях. Кроме того, применение белых светодиодов не ограничивается только белым спектром. Их можно использовать в комбинациях с узкополосными красными и синими светодиодами [19–21]. В связи с тем, что на сегодняшний день не так много исследований, посвященных изучению влияния типа освещения на органогенез лесных ягодных растений в культуре in vitro, эксперименты в данном направлении представляют как теоретическую, так и практическую ценность.
Цель исследования – изучение влияния типа освещения на процесс ризогенеза лесных ягодных растений при клональном микроразмножении.
Объекты и методы исследования
Исследования по выращиванию лесных ягодных растений в культуре in vitro проводили в лаборатории клонального микроразмножения растений на базе филиала ФБУ ВНИИЛМ «Центрально-европейская лесная опытная станция» в 2016–2020 гг.
В качестве объектов исследования использовались растения голубики полувысокорослой (сорт «Нортблю» и гибридная форма 23-1-11), княженики арктической (сорт «Анна» и гибридная форма К-1), клюква крупноплодная (сорт «Бен Лир» и гибридная форма 1-23-3), клюквы болотной (сорт «Дар Костромы» и гибридная форма 1-15-635), брусники обыкновенной (сорта «Рубин» и «Костромская розовая»), красники (Курильская и Сахалинская формы).
Растения голубики, клюквы и красники культивировали на питательной среде WPM (Wood Plant Medium), княженики – на питательной среде MS (Мурасиге-Скуга), брусники – на питательной среде Андерсона в условиях световой комнаты при температуре от +23 до +25 °C, влажности 75–80 % и фотопериоде 16/8 ч. На этапе «собственно микроразмножение» применяли регуляторы роста цитокининовой группы: при выращивании голубики, клюквы, брусники и красники – 2-изопенталаденин (2ip) в концентрациях 1,0–5,0 мл/л; при выращивании княженики – 6-бензиламинопурил (6-БАП) в концентрации 0,5 мл/л. На этапе укоренения in vitro использовали регуляторы роста ауксиновой группы. При выращивании голубики, клюквы, брусники и красники – индолилуксусная кислота (ИУК) в концентрации 0,5–1,0 мл/л; при выращивании княженики – индолилмасляная кислота (ИМК) в концентрации 0,5 мл/л.
При изучении влияния света на рост и развитие размножаемых растений использовали лампы различного спектрального состава: 1) ЛБ – люминесцентные лампы белого цвета (λ = 600 нм); 2) СД-Б – светодиодные лампы белого спектра (λ = 653 нм); 3) СД-Б+К+С – светодиодные лампы с комбинацией белого (λ = 653 нм), красного (λ = 670 нм) и синего (λ = 455 нм) спектров (рис. 1). Пробирки с растениями-регенерантами размещали в штативах из пенопласта, закрывающих от света корневую систему, и подвергали постоянному освещению. Учитывали количество, среднюю и суммарную длину корней в расчете на одно растение. Опыты проводили в 10-кратной биологической и 2-кратной аналитической повторностях.
|
|
|
|
a |
b |
Рисунок 1. Освещение регенерантов лесных ягодных растений светодиодными лампами:
a – белого спектра; b – с комбинацией белого, красного и синего спектров
Figure 1. Forest berry plant regenerants under LED lamps:
a – white spectrum; b – combination of white, red, and blue spectra
Статистическую обработку данных проводили при помощи программного обеспечения Microsoft Office 2016 и AGROS v.2.11. Применяли дисперсионный двухфакторный анализ, где фактор A – сорт или форма, фактор B – тип освещения. Достоверность различий между средними данными вариантов опыта оценивали с помощью наименьшей существенной разности для 5 %-го уровня значимости (НСР05).
Результаты и их обсуждение
В результате проведенных экспериментальных исследований выявлено, что при клональном микроразмножении на этапе укоренения in vitro наибольшее количество корней (в среднем 9,9 шт.) голубики полувысокорослой формировалось при освещении надземной части лампами СД-Б+К+С. Оно было в 2,8 раза больше, чем при освещении лампами СД-Б, и в 4,5 раза больше, чем при освещении ЛБ (табл. 1).
Таблица 1. Количество корней голубики полувысокорослой в зависимости от сорта и условий освещения
надземной части, шт.
Table 1. Number of roots of Vaccinium corymbosum L. × Vaccinium angustifolium Ait., depending on variety and light, pcs.
|
Сорт |
Освещение |
Среднее |
||
|
ЛБ |
СД-Б |
СД-Б+К+С |
||
|
«Нортблю» |
2,1 |
3,4 |
9,7 |
5,1 |
|
Гибридная форма 23-1-11 |
2,2 |
3,7 |
10,0 |
5,3 |
|
Среднее |
2,2 |
3,6 |
9,9 |
– |
|
НCР05 фактор А = 1,20, фактор В = 1,03, общ. = 2,02 |
||||
Наибольшая суммарная длина (в среднем 114,8 см) корней голубики была отмечена также при освещении надземной части лампами СД-Б+К+С и была в 7 раз больше, чем при освещении СД-Б, и в 14,9 раза больше, чем при освещении лампами ЛБ (табл. 2). Существенных различий биометрических показателей по сортам не выявлено.
Таблица 2. Суммарная длина корней голубики полувысокорослой в зависимости от сорта и условий освещения
надземной части, см
Table 2. Total length of roots of Vaccinium corymbosum L. × Vaccinium angustifolium Ait., depending on variety and light, cm
|
Сорт |
Освещение |
Среднее |
||
|
ЛБ |
СД-Б |
СД-Б+К+С |
||
|
«Нортблю» |
8,1 |
16,3 |
115,5 |
46,6 |
|
Гибридная форма 23-1-11 |
7,3 |
16,4 |
114,1 |
45,9 |
|
Среднее |
7,7 |
16,4 |
114,8 |
– |
|
НCР05 фактор А = 3,85, фактор В = 4,10, общ. = 3,91 |
||||
Наибольшее количество корней (в среднем 13,4 шт.) растений-регенерантов княженики арктической было отмечено при использовании ламп СД-Б+К+С. Оно было в 2,2 раза больше, чем в варианте освещения лампами СД-Б, и в 4,5 раза больше, чем при освещении ЛБ (табл. 3). Количество корней, в зависимости от сорта, не имело значительных различий.
Таблица 3. Количество корней княженики арктической в зависимости от сорта и типа освещения надземной части, шт.
Table 3. Number of roots of Rubus arcticus L., depending on variety and light, pcs.
|
Сорт |
Освещение |
Среднее |
||
|
ЛБ |
СД-Б |
СД-Б+К+С |
||
|
«Анна» |
2,8 |
6,5 |
12,7 |
7,3 |
|
Гибридная форма К-1 |
3,2 |
5,7 |
14,0 |
7,6 |
|
Среднее |
3,0 |
6,1 |
13,4 |
– |
|
НCР05 фактор А = 1,40, фактор В = 1,13, общ. = 2,10 |
||||
Суммарная длина корней растений княженики также была максимальной (в среднем 163,8 см) при использованием ламп СД-Б+К+С, что в 3,3 и 10,1 раза больше, чем при освещении лампами СД-Б и ЛБ соответственно (табл. 4).
Таблица 4. Суммарная длина корней княженики арктической в зависимости от сорта и типа освещения надземной части, см
Table 4. Total length of the roots of Rubus arcticus L., depending on variety and light, cm
|
Сорт |
Освещение |
Среднее |
||
|
ЛБ |
СД-Б |
СД-Б+К+С |
||
|
«Анна» |
13,6 |
52,6 |
139,7 |
68,6 |
|
Гибридная форма К-1 |
17,1 |
48,2 |
187,9 |
84,4 |
|
Среднее |
15,4 |
50,4 |
163,8 |
– |
|
НCР05 фактор А = 3,95, фактор В = 4,30, общ. = 6,81 |
||||
При этом суммарная длина корней у растений гибридной формы К-1 имела в 1,2 раза больше значение, чем у сорта «Анна» (рис. 2).
Рисунок 2. Корнеобразование in vitro растений княженики арктической сорта «Анна» (1) и гибридной формы К-1 (2) при освещении лампами: а – ЛБ; b – СД-Б; c – СД-Б+К+С
Figure 2. Root formation in vitro of Rubus arcticus L. cultivar Anna (1) and hybrid K-1 (2) under a – white fluorescent lamps; b – white spectrum LED lamps; c – LED lamps with a combination of white, red, and blue spectra
В рисунке: заменить а, б, в на а, b, c
При укоренении растений-регенерантов клюквы крупноплодной и клюквы болотной формирование наибольшего количества корней (в среднем 13,9–14,6 шт.) наблюдалось при освещении лампами СД-Б+К+С. Это в 2,1–2,3 больше, чем при освещении СД-Б, и в 2,4–2,6 раза больше, чем при освещении ЛБ (табл. 5). Различия по количеству корней, в зависимости от сорта, у обоих видов клюквы были незначительны.
Таблица 5. Количество корней клюквы болотной в зависимости от сорта и спектрального диапазона освещения
надземной части, шт.
Table 5. Number of roots of Oxycoccus palustris Pers., depending on variety and spectrum, pcs.
|
Сорт |
Освещение |
Среднее |
||
|
ЛБ |
СД-Б |
СД-Б+К+С |
||
|
Клюква крупноплодная |
||||
|
«Бен Лир» |
6,0 |
7,1 |
13,1 |
8,7 |
|
Гибридная форма 1-23-3 |
6,3 |
6,9 |
16,0 |
9,7 |
|
Среднее |
6,2 |
7,0 |
14,6 |
– |
|
НCР05 фактор А = 1,91, фактор В = 1,72, общ. = 2,53 |
||||
|
Клюква болотная |
||||
|
«Дар Костромы» |
5,9 |
6,5 |
12,3 |
8,2 |
|
Гибридная форма 1-15-635 |
4,8 |
5,7 |
15,4 |
8,6 |
|
Среднее |
5,4 |
6,1 |
13,9 |
– |
|
НCР05 фактор А = 1,49, фактор В = 1,31, общ. = 2,21 |
||||
Максимальная суммарная длина корней клюквы крупноплодной и клюквы болотной (в среднем 133,6–156,9 см) отмечена при освещении надземной части лампами СД-Б+К+С и была в 2,6–3,1 раза больше, чем в варианте освещения СД-Б, и в 3,3–3,8 раза больше, чем при освещении лампами ЛБ (табл. 6). При этом при освещении лампами СД-Б+К+С суммарная длина корней клюквы крупноплодной и клюквы болотной гибридных форм была в 1,2–1,3 раза больше, чем у растений сортов «Бен Лир» и «Дар Костромы» соответственно.
Таблица 6. Суммарная длина корней клюквы болотной в зависимости от сорта и спектрального диапазона освещения надземной части, см
Table 6. Total length of roots of Oxycoccus palustris Pers., depending on variety and spectrum, cm
|
Сорт |
Освещение |
Среднее |
||
|
ЛБ |
СД-Б |
СД-Б+К+С |
||
|
Клюква крупноплодная |
||||
|
«Бен Лир» |
39,9 |
50,8 |
122,1 |
70,9 |
|
Гибридная форма 1-23-3 |
40,3 |
52,3 |
145,0 |
79,2 |
|
Среднее |
40,1 |
51,6 |
133,6 |
– |
|
НCР05 фактор А = 4,73, фактор В = 5,11, общ. = 3,62 |
||||
|
Клюква болотная |
||||
|
«Дар Костромы» |
46,6 |
55,2 |
141,2 |
81,0 |
|
Гибридная форма 1-15-635 |
36,5 |
46,7 |
172,6 |
85,3 |
|
Среднее |
41,6 |
51,0 |
156,9 |
– |
|
НCР05 фактор А = 4,89, фактор В = 5,42, общ. = 3,91 |
||||
При укоренении растений-регенерантов брусники обыкновенной освещение надземной части лампами СД-Б+К+С способствовало формированию наибольшего количества корней (в среднем 3,9 шт.), что в 1,6 и 2,4 раза больше, чем при освещении лампами СД-Б и ЛБ соответственно (табл. 7). В зависимости от сорта существенных различий по количеству корней не отмечено.
Таблица 7. Количество корней брусники обыкновенной зависимости от сорта и типа освещения надземной части, шт.
Table 7. Number of roots of Vaccinium vitis-idaea L., depending on variety and light, pcs.
|
Сорт |
Освещение |
Среднее |
||
|
ЛБ |
СД-Б |
СД-Б+К+С |
||
|
«Костромская розовая» |
1,8 |
2,5 |
4,5 |
2,9 |
|
«Рубин» |
1,3 |
2,3 |
3,2 |
2,3 |
|
Среднее |
1,6 |
2,4 |
3,9 |
– |
|
НCР05 фактор А = 1,67 фактор, В = 1,44, общ. = 2,33 |
||||
Суммарная длина корней брусники была максимальной (в среднем 15,5 см) при освещении надземной части лампами СД-Б+К+С и была 3,5 и 8,6 раза больше, чем при использовании освещения СД-Б и ЛБ соответственно (табл. 8). При этом у растений сорта «Костромская розовая» суммарная длина корней в 1,5 раза превышала показатель сорта «Рубин».
Таблица 8. Суммарная длина корней брусники обыкновенной в зависимости от сорта и типа освещения надземной части, см
Table 8. Total length of roots of Vaccinium vitis-idaea L., depending on variety and light, cm
|
Сорт |
Освещение |
Среднее |
||
|
ЛБ |
СД-Б |
СД-Б+К+С |
||
|
«Костромская розовая» |
2,6 |
4,6 |
18,5 |
8,6 |
|
«Рубин» |
1,0 |
4,2 |
12,5 |
5,9 |
|
Среднее |
1,8 |
4,4 |
15,5 |
– |
|
НCР05 фактор А = 1,97, фактор В = 1,65, общ. = 2,41 |
||||
Наибольшее количество корней у растений красники (в среднем 3,4 шт.) наблюдалось при освещении наземной части лампами СД-Б+К+С и было в 1,1 и 2,0 раза больше, чем в вариантах освещения лампами СД-Б и ЛБ соответственно (табл. 9).
Таблица 9. Количество корней красники зависимости от формы и типа освещения надземной части, шт.
Table 9. Number of roots of Vaccinium praestans Lamb., depending on shape and light, pcs.
|
Форма |
Вариант освещения |
Среднее |
||
|
ЛБ |
СД-Б |
СД-Б+К+С |
||
|
Сахалинская |
1,5 |
2,7 |
3,2 |
2,5 |
|
Курильская |
1,8 |
3,3 |
3,5 |
2,7 |
|
Среднее |
1,7 |
3,0 |
3,4 |
– |
|
НCР05 фактор А = 0,87, фактор В = 0,64, общ. = 1,03 |
||||
Суммарная длина корней красники была также максимальной (в среднем 10,0 см) при освещении надземной части растений лампами СД-Б+К+С, что в 2,3 раза больше, чем при освещении лампами СД-Б, и в 4,6 раза больше, чем при освещении ЛБ (табл. 10).
Таблица 10. Суммарная длина корней красники в зависимости от формы и типа освещения надземной части, см
Table 10. Total length of roots of Vaccinium praestans Lamb., depending on shape and light, cm
|
Форма |
Вариант освещения |
Среднее |
||
|
ЛБ |
СД-Б |
СД-Б+К+С |
||
|
Сахалинская |
1,8 |
4,1 |
9,3 |
5,1 |
|
Курильская |
2,5 |
4,6 |
10,8 |
6,0 |
|
Среднее |
2,2 |
4,4 |
10,0 |
– |
|
НCР05 фактор А = 1,75, фактор В = 1,35, общ. = 2,31 |
||||
Существенных различий биометрических показателей растений красники по количеству и суммарной длине корней, в зависимости от формы, не выявлено.
Выводы
По результатам проведенных экспериментальных исследований установлено, что при клональном микроразмножении лесных ягодных растений (голубика полувысокорослая, княженика арктическая, клюква крупноплодная, клюква болотная, брусника обыкновенная, красника) перспективных сортов и форм наибольшее количество корней (3,4–14,6 шт.) максимальной длины (10,0–156,9 см) формировалось при освещении надземной части растений-регенерантов светодиодными лампами с комбинацией белого, красного и синего спектров. При этом в большинстве вариантов не наблюдалось существенных различий по биометрическим показателям в зависимости от сорта или формы. Однако суммарная длина корней растений княженики арктической, клюквы крупноплодной и клюквы болотной гибридных форм имела показатели в 1,2–1,3 больше, чем у растений сравниваемых сортов.
Таким образом, при клональном микроразмножении целесообразно применение светодиодных ламп. Это способствует лучшему протеканию процесса ризогенеза лесных ягодных растений по сравнению с освещением люминесцентными лампами. При использовании комбинации белого, синего и красного спектров на этапе укоренения растений в культуре in vitro биометрические показатели значительно увеличиваются.
Критерии авторства
С. С. Макаров руководил проектом, проводил закладку лабораторного опыта на всех этапах клонального микроразмножения, проводил анализ литературных источников по вопросу использования биотехнологических способов размножения лесных ягодных растений. С. А. Родин и С. Ю. Цареградская проводили анализ литературных источников по вопросу актуальности использования и хозяйственной ценности лесных ягодных растений. И. Б. Кузнецова проводила закладку лабораторного опыта на этапе укоренения растений in vitro, проводила статистическую обработку данных. А. И. Чудецкий проводил статистическую обработку данных.
Конфликт интересов
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Благодарности
Выражаем благодарность канд. биол. наук Г. В. Тяк, канд. биол. наук Г. Ю. Макеевой, канд. с.-х. наук И. А. Кореневу, канд. биол. наук Л. Е. Курлович, А. В. Тяку, В. А. Макееву.
Contribution
S.S. Makarov supervised the project, conducted the initial stage of laboratory experiments, and reviewed the literature on biotechnological methods of propagation of forest berry plants. S.A. Rodin and S.Yu. Tsaregradskaya reviewed publications on the relevance and economic value of forest berry plants. I.B. Kuznetsova performed laboratory experiments at the stage of plant rooting and processed statistical data. A.I. Chudetsky was responsible for statistical data processing.
Conflict of interest
The authors declare that there is no conflict of interest regarding the publication of this article.
Acknowledgments
The authors express our gratitude to G.V. Tyak, Сand.Sci. (Biol.), G.Yu. Makeeva, Сand.Sci. (Biol.), I.A. Korenev, Сand.Sci. (Agri.), L.E. Kurlovich, Сand.Sci. (Biol.), A.V. Tyak, Сand.Sci. (Biol.), and V.A. Makeev, Сand.Sci. (Biol.).
1. Тяк Г. В. Выращиваем княженику // Питомник и частный сад. 2016. № 1. С. 18-22.
2. Dróżdż P., Šėžienė V., Pyrzynska K. Phytochemical properties and antioxidant activities of extracts from wild blueberries and lingonberries // Plant Foods for Human Nutrition. 2017. Vol. 72. № 4. P. 360-364. https://doi.org/10.1007/s11130-017-0640-3.
3. Cranberry reduces the risk of urinary tract infection recurrence in otherwise healthy women: A systematic review and meta-analysis / Z. Fu [et al.] // Journal of Nutrition. 2017. Vol. 147. № 12. P. 2282-2288. https://doi.org/10.3945/jn.117.254961.
4. Polyphenols, anthocyanins, and flavonoids contents and the antioxidant capacity of various cultivars of highbush and half-high blueberries / D. Li [et al.] // Journal of Food Composition and Analysis. 2017. Vol. 62. P. 84-93. https://doi.org/10.1016/j.jfca.2017.03.006.
5. The antiadhesive activity of cranberry phytocomplex studied by metabolomics: Intestinal PAC-A metabolites but not intact PAC-A are identified as markers in active urines against uropathogenic Escherichia coli / G. Peron [et al.] // Fitoterapia. 2017. Vol. 122. P. 67-75. https://doi.org/10.1016/j.fitote.2017.08.014.
6. Ragnar M. Åkerbär. Black Island Books, 2017. 176 p.
7. Vaccinium vitis-idaea L., origin from Bulgaria indicate in vitro antitumor effect on human cervical and breast cancer cells / S. G. Angelova [et al.] // American Scientific Research Journal for Engineering, Technology, and Sciences. 2019. Vol. 56. № 1. P. 104-112.
8. Debnath S. C., An D. Antioxidant properties and structured biodiversity in a diverse set of wild cranberry clones // Heliyon. 2019. Vol. 5. № 4. https://doi.org/10.1016/j.heliyon.2019.e01493.
9. Philip N., Walsh L. J. Cranberry polyphenols: Natural weapons against dental caries // Dentistry Journal. 2019. Vol. 7. № 1. https://doi.org/10.3390/dj7010020.
10. Effects of blueberry and cranberry consumption on type 2 diabetes glycemic control: A systematic review / D. M. U. P. Rocha [et al.] // Critical Reviews in Food Science and Nutrition. 2019. Vol. 59. № 11. P. 1816-1828. https://doi.org/10.1080/10408398.2018.1430019.
11. Coleman C. M., Ferreira D. Oligosaccharides and complex carbohydrates: A new paradigm for cranberry bioactivity // Molecules. 2020. Vol. 25. № 4. https://doi.org/10.3390/molecules25040881.
12. Recent research on the health benefits of blueberries and their anthocyanins / W. Kalt [et al.] // Advances in Nutrition. 2020. Vol. 11. № 2. P. 224-236. https://doi.org/10.1093/advances/nmz065.
13. Тяк Г. В., Курлович Л. Е., Тяк А. В. Биологическая рекультивация выработанных торфяников путем создания посадок лесных ягодных растений // Вестник Казанского государственного аграрного университета. 2016. Т. 11. № 2. С. 43-46. https://doi.org/10.12737/20633.
14. Мацнева О. В., Ташматова Л. В. Клональное микроразмножение земляники - перспективный метод современного питомниководства (обзор) // Современное садоводство. 2019. № 4. С. 113-119. https://doi.org/10.24411/2312-6701-2019-10411.
15. Макаров С. С., Кузнецова И. Б., Смирнов В. С. Совершенствование технологии клонального микроразмножения княженики арктической (Rubus arcticus L.) // Лесохозяйственная информация. 2018. № 4. С. 91-97. https://doi.org//10.24419/LHI.2304-3083.2018.4.09.
16. Коренев И. А., Тяк Г. В., Макаров С. С. Создание новых сортов лесных ягодных растений и перспективы их интенсивного размножения (in vitro) // Лесохозяйственная информация. 2019. № 3. С. 180-189. https://doi.org/10.24419/LHI.2304-3083.2019.3.15.
17. Особенности клонального микроразмножения клюквы болотной (Oxycoccus рalustris Pers.) / С. С. Макаров [и др.] // Техника и технология пищевых производств. 2021. Т. 51. № 1. С. 67-76. https://doi.org/10.21603/2074-9414-2021-1-67-76.
18. Obtaining high-quality planting material of forest berry plants by clonal micropropagation for restoration of cutover peatlands / S. S. Makarov [et al.] // Lesnoy zhurnal. 2021. Т. 380. № 2. P. 21-29.
19. Тихомиров А. А., Ушакова С. А. Научные и технологические основы формирования фототрофного звена биолого-технических систем жизнеобеспечения. Красноярск: Сибирский государственный университет науки и технологий имени академика М. Ф. Решетнева, 2016. 200 с.
20. LED light for in vitro and ex vitro efficient growth of economically important highbush blueberry (Vaccinium corymbosum L.) / C. D. Hung [et al.] // Acta Physiologiae Plantarum. 2016. Vol. 38. № 6. https://doi.org/10.1007/s11738-016-2164-0.
21. Application of light-emitting diodes for improving the nutritional quality and bioactive compound levels of some crops and medicinal plants / W.-S. Jung [et al.] // Molecules. 2021. Vol. 26. № 5. https://doi.org/10.3390/molecules26051477.
