Переработка молочной сыворотки является производственной необходимостью. Перспективны биотехнологические процессы с использованием сыворотки для культивирования лактозосбраживающих дрожжей. Цель работы – исследование закономерностей культивирования в подсырной и творожной сыворотке коллекционных штаммов дрожжей рода Kluyveromyces при отдельном, совместном применении и после гибридизации. В результате проведения экспериментов установлено, что самый быстрый рост и максимальное накопление биомассы было получено с использованием штамма K. marxianus 459 в подсырной сыворотке (до lgN 9 через 24 ч и lgN 9,8 через 48 ч культивирования). В творожной сыворотке штаммы K. marxianus 459 и 1338 адаптировались быстрее, а K. lactis 1339 медленнее, чем в подсырной. Гибриды штаммов K. lactis 1333 × K. marxianus 1338 и K. lactis 1333 × 1339 показали более высокую скорость роста, чем отдельные штаммы, в течение 24 ч в обоих видах сыворотки, разница значений lgN составила 7,6–31 % в зависимости от сырья и штамма. Наиболее активное образование летучих компонентов обнаружено в опытах со смесью K. lactis 1333 + K. marxianus 1338 в творожной и подсырной сыворотке. Таким образом, совместное культивирование и гибридизация (как межштаммовая, так и межвидовая) некоторых лактозосбраживающих дрожжей может приводить к изменению их биохимических и физиологических свойств, что соответствует данным, представленным в работах других исследователей. Полученные результаты могут быть использованы при получении бета-галактозидаз для биосинтеза олигосахаридов-пребиотиков.